ヘペスバッファ溶液 CAS 7365-45-9 の調製方法

HEPES 緩衝溶液の重要性を理解する

HEPES は,良い水素イオンバッファとして,外部の要因 (例えばCO2,細胞培養などの様々な実験条件下での溶液のpH値について酵素活性決定,タンパク質浄化.その独特の化学構造は,細胞内部に浸透せず,優れたバッファング能力を備えています.細胞環境の安定性を確保する細胞培養に理想的な選択となります

HEPES 粉

準備段階: 材料と設備

1主な材料:HEPES粉末 (高純度,一般的に推奨 ≥99%),超純水 (または離子化水),必要な塩 (NaCl,KClなど),特殊な実験需要に応じて追加)酸塩調節剤 (NaOH,HClなど)

2装置:電子バランス (0.1mg の精度),磁気ミラー,pHメーター,体積計球 (必要に応じて適切な仕様を選択),パイペットと銃頭,測定シリンダーなど.

計算 と 秤

1必要な量を計算する.まず,実験要求に基づいて必要なバッファ溶液の総体積と最終pH値を決定する.文献を参照するか,オンラインツールを使用して,HEPES粉末の必要な質量と他の成分の割合を計算してください..

2正確な重み: 電子バランスを用いて計算されたHEPES粉末および他の必要な成分 (NaClなど) を重み,汚染や損失を避けるように注意してください.

pH を調節する

1予備溶解: 重量されたHEPES粉末および他の塩分を超純水にゆっくりと加え,完全に溶解するまで磁気調動器で徹底的に混ぜます.溶解過程で熱が生じる可能性があることに注意してください.調理速度と時間を適切に制御する必要があります.

2溶液のpH値を監視するためにpHメーターを使用して,目標pH値に達するまで調整するために適量のNaOHまたはHCl溶液をゆっくりと追加します.調整過程で,均質なpH値を確保するために,継続的な混ぜ合わせが必要です..

3再確認: 調整が完了した後,溶液のpH値を確認し,それが正しいことを確認するために,pHメーターを再利用します.

容量設定と維持

1定体体積: 調整された溶液を容量計のコラスに移し,超純水で望ましい体積まで稀釋し,均等に混ぜ続けます.

2フィルタリング: 汚染物質を除去するために,溶液を無菌膜でフィルタリングすることができる.このステップは,細胞培養などの無菌実験において特に重要です.

3保存: 準備済みのHEPESバッファ溶液を,準備日,pH値,および使用者情報を示す清潔な容器に移動し,4°Cの冷蔵庫に保管します.バッファリング効果に影響を及ぼさないように,繰り返し凍結や解凍を避けるように注意してください..

注目すべき問題

1調製過程では,汚染を防ぐために,無毒操作の原則を厳格に遵守する必要があります.

2HEPES粉末は水分吸収に易いので,保管中に水分を吸収しないように密封する必要があります.

3異なるバッチのHEPES粉末のpH調整能力はわずかに異なるので,pH値を再測定し,準備するたびに調整する必要があります.

4長期保存が緩衝効果に影響を与える可能性があるため,準備されたHEPESバッファはできるだけ早く使用する必要があります.
Hubei Xindesheng Material Technology Co., Ltd.は,研究と生産の豊富な経験を持つ,ほぼ20年間,ヘプスバッファなどの生物学的バッファエージェントを研究してきました.中国で有名な高品質のメーカーです.

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