DEPC処理トリス緩衝液RNAの実験成功の鍵

分子生物学の研究では RNA実験の成功や失敗は しばしば見過ごされる側面― 実験用水の質に左右されます研究者が RNA に関する実験を行うときタンクを準備するために使用される水は,高い基準を満たさなければなりません.溶液に存在する可能性のあるRNA酵素の微量も,実験過程でRNAサンプルを継続的に分解することができます.実験結果の偏差や失敗に至る.

RNA 酵素の継続的な分解

RNA 酵素 の 脅威 は どこにでも あり ます.この 安定 し た タンパク質 分子 は 高温 の 滅菌 に 耐える こと が でき,様々な 実験 条件 の 中 で 活動 を 維持 し ます.バッファーに存在するとこの分解過程はしばしば静かで 細胞が分子を分解する過程でしかし,リバーストランスクリプションや定量PCRなどの実験が失敗するには十分です..

TRIS パウダー

DEPCの抑制原理

DEPCは,クラシックなRNA酵素阻害剤として,RNAの完整性を確保する重要な役割を果たします.その作用メカニズムはかなり特徴的です.アミノ,チオール,様々な酵素のヒドロキシル群酵素の結合部位を破壊し,触媒活性を失わせる.この作用は,すべてのタイプのヌクレアースを完全に抑制するわけではありません.信頼性の高い保護を rutin RNA実験で提供できます

DEPC処理バッファの保護効果

DEPC で処理された Tris バッファーは,RNA サンプルに効果的な保護バリアを作り出します.処理中に,DEPC 分子は,水溶液中のRNA ゼと反応します.この酵素分子がRNAを分解する能力を失ってしまうのです研究者がこのようなバッファをRNA抽出,浄化,保存に使用すると,重要な段階でのRNA損失のリスクを減らすことができます.

DEPC処理Trisバッファの価値は,実用的な応用では,複数の実験段階に反映されています.RNA の降水と洗浄にそして最後に溶解と保存まで DEPC で処理されたバッファ溶液は,あらゆる段階において RNA 完整性を継続的に保護することができます.この保護効果は,特に微小RNAサンプルを操作する際に顕著です検体サイズが小さいほど,RNAse汚染の影響が顕著である.

DEPC残留物除去方法

DEPCで処理されたバッファ溶液は,使用前に残留DEPCを除去するために高温と高圧にさらさなければならないことに注意する.これは,DEPCが RNA 酵素を有効に無活性化させることができるからです実験の結果の信頼性を確保するために必要なステップである.このステップは面倒に見えるかもしれませんが,

実験における基本的保護の重要性

研究者達がDEPCで処理されたTrisバッファを選んだことは,本質的に実験のための保護プログラムを設定しています.この種の保護は複雑な操作を必要としません.実験の基本プロセスを変更しません実験データに異常があるとき,RNAサンプルが繰り返し分解され,繰り返し実験で安定した結果が得られないとき,バッファー溶液の質はしばしばチェックに値する方向です.

実験設計の観点から RNA酵素の汚染を制御することは 基本的な課題です純粋な反応システムが必要ですDEPCによって処理されるTrisバッファは,この基本システムの不可欠な部分です.それは反応剤だけでなく,実験結果の信頼性の保証でもあります.

製品パッケージ

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