トリプシンはである何
トリプシン(C6H15O12P3)は一種のプロテアーゼである。脊椎動物では、それは消化酵素として作用する。膵臓では、それはtrypsinogen酵素の前駆物質として総合される。それは膵液の部品として分泌し、enterokinaseまたはトリプシンの制限の下の活動化させたトリプシンに分解する。ポリペプチドの鎖のリジンおよびアルギニン残余のcarboxyl側面を切ることができるのはエンドペプチダーゼである。それは消化酵素としてだけでなく、作用するが、またchymotrypsinogen、カルボキシペプチダーゼおよびホスホリパーゼのような他の酵素の前駆物質の分解を限り、活動化効果をもたらす。それは特定のプロテアーゼであり、蛋白質のアミノ酸順序の決定の不可欠な用具になった。
ブタのトリプシンの導入
ブタのtrypsinogenの相対的な分子量は約24 000である。等電ポイントの相違に従って、ブタのtrypsinogen陰イオンに分けることができる(pl6.8<6>)。カチオンのタイプにだけでなく、大きい比重があるが、また陰イオンのタイプよりよい安定性があるので、カチオンのブタのtrypsinogen構造および表現に選ばれた。ブタのtrypsinogen 6組の変性の難しさおよびそれに続く実験の包含ボディのrenaturationを非常に高めた二硫化物結束(30-160、48-64、132-233、139-206、171-185、196-220)を形作ることができる12システインを含んでいる。
ブタのトリプシンの適用
ブタのトリプシンは表面の付着性の細胞の取り外しのために添加物として、インフルエンザ ウイルス ワクチンの生産、蛋白質のインシュリンおよび他の蛋白質、急速な加水分解、および動物の細胞およびティッシュの前処理使用することができる一種のトリプシンである。高い純度および強い活動のトリプシンのための大きい要求がある。現在、組換えのブタのtrypsinogenの準備プロセスは確立され、得られた組換えのブタのトリプシンによい酵素活性があり、工業化された研究および生産にある特定の実験基礎を提供する他の動物の源の汚染を含んでいない。
ブタのトリプシンの特徴
ブタのトリプシンは実際のところ不安定、自己分解に傾向がある。eukaryotic表現システムは得ることを組換えのブタのtrypsinogen表現システムを組み立てるとき、この自己分解の特徴が困難にする完全なtrypsinogenおよび活動化させたプロダクトはホストに影響を与える。細胞はまた有毒である場合もある従ってprokaryotic表現システムを選ぶことを考慮しなさい。さらに、自己分解の特徴はブタのtrypsinogenの活発化の状態また厳しく制御される必要があるように要求する。
ブタのトリプシンの準備方法
従来の準備方法では、多くの分離および浄化のステップおよび蛋白質および原因の不活性化への損害を与えて容易の長い時間ある。低い収穫に終って。従って、ブタのトリプシンの準備そして生産は動物の膵臓からの組換えの表現の生産に抽出から次第に移った。組換えのブタのtrypsinogen得られたエシェリヒア属大腸菌の表現システムの構築によるトリプシンの生産はまた関連の病原体の汚染の危険および提供者の動物起源による未知のウイルスを運ぶ危険を避けることができる。