HEPES は,非イオン性アンフォテリックバッファの一種です.HEPESバッファ2 - [4 - (2-ヒドロキシエチル) - 1-ピペラジニル]エタヌスルフォニック酸である.HEPESは,pH 7.2-7の範囲で良いバッファ能力を持つ非離子アンフォテリックバッファの一種である.4この状態では,細胞培養瓶の蓋を締め,培養基に必要な少量の炭酸物が空中に散らばないようにする必要があります.
ほとんどの培養媒体は,pH指標としてフェノール赤を含んでいる.酸性培養媒体はオレンジ黄色で,アルカリ性培養媒体は濃い赤である.HEPES は 高価 で,高濃度 で ある 細胞 に は 毒性 が ある こと が あり ますバイオカルチャー環境の高濃度の制限を取り除くため,ヒップスはバイカーボナートの代わりにバッファとして使用できます.実際はそれほど簡単ではありません.溶けた二酸化炭素とバイカーボネートも 細胞の良好な成長に非常に重要です.
HEPES は2つの方法で使用できます.
(1) HEPES は,必要な濃度に応じて,準備された培養基に直接加えられ,その後細菌を除去するためにフィルタリングすることができます. 1000ml の培養基に 2.38g HEPES を加えます.pH を 7 に調整する溶解後,フィルタリングし,無菌化後に使用する.HEPESの濃度は10 mmol/Lでした.
(2) 使用前に,培養基を99mlを1mlの保存基に添加し,最終濃度は依然として10mmol/Lでした. 方法:pH 7 に調整LN NaOH で,その後水で100mlに稀釋し,フィルタリングして無菌化し,小さなボトル (2ml/ボトル) に包装され,4°Cまたは-20°Cで保存します.
4-ヒドロキシエチルピペラジンエタヌスルフォン酸は細胞に毒性作用がない.それは水素離子バッファであり,長期間にわたって恒定的pH範囲を制御することができる.最終濃度が10〜50 mmol/Lで,培養基質が20 mmol/LのHEPESを含んでいる場合生物学的バッファ,反応バッファ,混血前バッファ,混血後バッファとして,RNA核成分の分離と分析に使用できます.そしてRNAとt4rna.
分子生物学級は,t4rnaリガース化学本,反応バッファ成分の分離と分析でRNA3'末端ラベルに使用されます.核RNAの混合前バッファとバッファ成分細胞から細胞への粘着,短期間の細胞集積培養,組織と細胞浄化バッファ
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