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いつHepesの緩衝を使用するか。

2021-05-26
いつHepesの緩衝を使用するか。

完全名HEPESバッファ4ヒドロキシエチルピペラジンエタヌスルフォン酸,CAS 7365-45-9,HEPESはしばしば生物バッファに使用され,pHバッファ範囲: 6.8-8.2,ヘプスバッファの主成分は,ヒドロキシエチルピペラジンエチル硫酸である.HEPESは,水溶性であり,金属イオンと安定した複合体を形成しないアンフォテリックバッファである.pH 7 の範囲で良いバッファリング能力があります.2-7.4主に生化学診断キット,DNA/RNA抽出キット,PCR診断キットで使用されています.


様々な生化学反応に使用されます.


1. HEPESバッファー複数の種類の生物の細胞培養基質,細胞粘着,短期間の細胞集積と培養,組織や細胞の浄化のためのバッファ反応体としてしばしば使用されます.


2タンパク質研究において,PIPESは,カチオン交換色素学における結合バッファの成分および溶液としてしばしば使用される.


3DNA研究において,PIPESは,カルシウムリン酸塩とDNA沉積物形成システム,およびAFMおよび電極化実験のためのバッファとして使用されます.


4さらに,HEPESは,DNAと制限酵素の反応に一定の干渉を持ち,ローリーの方法ではタンパク質含有量を決定するのに適していません.


5HEPESバッファは,しばしば臓器細胞と高度に変化し,pHに敏感なタンパク質と酵素,および生化学診断キットの研究に使用されます.DNA/RNA抽出キットとPCR診断キット.


6. 反応バッファ,プリハイブリデーションバッファ,およびRNA核成分を分離および分析するためのハイブリデーションバッファ;RNAおよびT4RNAに使用される.分子生物学グレードは,T4RNAリガースでRNAの3'-端をラベルするために使用されます核RNAの反応バッファ,プリハイブリデーションバッファ,ハイブリデーションバッファの成分を分離し分析する.


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HEPES 粉


HEPES に関する問題


1ほとんどの細胞に必要なpHは7.2-7.4細胞培養のための適切なpHは,培養される細胞の種類によって異なります.繊維芽細胞は,より高いpH (7.4-7.7) を好みます.0〜7.4) ほとんどの培養液は,ナトリウムバイカーボネート (NaHCO3) とCO2のシステムでバッファリングされるため,ガス相におけるCO2濃度は,培養液中のナトリウムバイカルボナート濃度と均衡状態にある必要があります.ガス相または保育器空気のCO2濃度が5%に設定された場合,培養溶液に添加されたNaHCO3の量は1.97g/Lです.CO2濃度が10%に維持された場合,培養溶液に添加されたNaHCO3の量は3.95g/L 細胞培養瓶の蓋は,ガス交換を確保するために,太りすぎないように螺旋する.


2HCO3とCO2のバッファペアを用いた培養溶液のpH値は不安定であり,一定の期間保存した後はアルカリ性傾向があります.培養液のpHが急速に変化した場合培養液にHEPESバッファを10-25mMの最終濃度まで加えることができる.


3. HEPESは,主に酸化性 fosforylation,無菌環境でのタンパク質合成,光合成性 fosforylation,CO2固定など,生物学的研究に使用されるアンフォテリックバッファです.HEPES は金属イオナーゼの基板に作用せず,電子顕微鏡 (TEM) で伝達するのに適しています.細胞培養基質では,開かれた培養または細胞観察中に比較的恒定的pH値を保持できるという利点があります.高濃度CO2培養環境の制限を緩和するために,バイカーボネートバッファ (10-15mM) を追加する溶けた二酸化炭素とバイカーボネートは 細胞の良好な成長にも非常に重要です