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いつHepesの緩衝を使用するか。

2021-05-26
いつHepesの緩衝を使用するか。

HEPESのフル ネームは4-hydroxyethylpiperazine ethanesulfonic酸、CASである7365-45-9、HEPES生物的緩衝、pHのバッファ範囲で頻繁に使用されるである:6.8-8.2は、hepesの緩衝の主要なコンポーネントhydroxyethylpiperazineのethyl硫酸である、HEPESは水で溶け、金属イオンが付いている安定した複合体を形作らない両性緩衝である。それに7.2-7.4のpHの範囲でよいバッファ キャパシティがある。それは生化学的な診断キット、DNA/RNAの抽出のキットおよびPCRの診断キットで大抵使用される。

 

いろいろ生化学的な反作用で使用される:

1. HEPESの緩衝はさまざまなタイプのクリーニングのティッシュおよび細胞のための有機体の細胞培養媒体の緩衝試薬として頻繁に使用される、細胞細胞の付着、短期細胞集合および文化および緩衝;


2. 蛋白質の研究では、管は陽イオン交換クロマトグラフィーの結合の緩衝の部品そして溶離液として頻繁に使用される;


3. DNAの研究では、管はAFMおよび電気穿孔法の実験のために緩衝と緩衝としてカルシウム隣酸塩およびDNAの沈殿物の形成システムのために使用される。


4. さらに、HEPESにDNAと制限の酵素間の反作用にある特定の干渉があり、Lowryの方法が蛋白質内容を定めることは適していない。


5. HEPESの緩衝は細胞器官の研究で頻繁に使用されるおよび極めて変わりやすく、pHに敏感な蛋白質および酵素、また生化学的な診断キット、DNA/RNAの抽出のキットおよびPCRの診断キット。


6. RNAの核部品を分け、分析するための反作用の緩衝、前交配の緩衝および交配の緩衝;RNAおよびT4RNAのために使用される。分子生物学の等級が3'を- T4 RNAのリガーゼが付いているRNAの端分類し、反作用の緩衝の部品、核RNAの前交配の緩衝および交配の緩衝を分け、分析するのに使用されている。

 

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HEPESは関連問題を

1. ほとんどの細胞に必要なpHは7.2-7.4であるが、細胞培養のための適切なpHは培養される細胞のタイプと変わる。繊維芽細胞は変形させた細胞ラインの道は酸味を要求するが、より高いpH (7.4-7.7)を好む。pH (7.0-7.4)。ほとんどの文化液体が重炭酸ナトリウムガス段階の二酸化炭素の集中が文化液体の重炭酸ナトリウムの集中の平衡にあるべきである(NaHCO3)および二酸化炭素のシステムによって緩衝されるので。ガス段階または定温器の空気の二酸化炭素の集中が5%で置かれれば、NaHCO3の量は文化解決でである1.97g/L加えた;二酸化炭素の集中が10%で維持されれば、NaHCO3の量は文化解決でである3.95g/L.加えた。細胞培養のビンの王冠はガス交換を保障するには余りに堅くねじで締まるべきではない;

 

2. HCO3および二酸化炭素の緩衝を使用して文化解決の水素イオン濃度指数は組不安定で、ある特定の一定期間の貯蔵の後でアルカリでありがちである。文化流動変更のpHが10-25mMの最終的な集中への文化液体に加えられるには余りにすぐに、HEPESの緩衝できれば;

 

3. HEPESは大抵生殖不能の環境の酸化的リン酸化、蛋白質の統合、光合成のリン酸化、二酸化炭素の固定、等のような生物的研究で使用される両性緩衝、である;HEPESは金属のionaseの基質に対する効果をもたらさないし、電子顕微鏡検査(TEM)の伝達のために適している;細胞培養媒体では、利点は開いた文化または細胞の観察の間に比較的一定した水素イオン濃度指数を維持できることである。重炭酸塩の緩衝の代理、または重炭酸塩の緩衝(10-15mM)の付加としてHEPES (25mM)が高集中の二酸化炭素文化環境の制限を取り除くのに使用することができる。分解された二酸化炭素および重炭酸塩はまたよい細胞の成長のために非常に重要である。