細胞生物学や分子生物学の研究では 293T細胞は ヒト胚性腎臓細胞線として科学研究における人気のあるモデルシステムになりました 容易なトランスフェクションと外生遺伝子の良好な発現によりこれらの細胞が健康的に成長し,生物学的特性を維持できるようにするには,培養条件の正確な制御が不可欠であり,pH安定性が基礎の一つである.HEPESバッファ(4- (2-ヒドロキシエチル) -1-ピペラゼニテタン硫酸) は,細胞培養基質のpH安定を維持する良いバッファとして,代替できない役割を果たします.この記事では,HEPES の適切な pH 範囲と,293T 細胞を培養するときに細胞培養におけるその応用戦略について詳しく説明します..
HEPES の役割と重要性
HEPES は,広範囲の pH 範囲 (通常 6.8 から 8.2) で溶液の pH 安定性を維持できる優れた有機バッファー剤です.ほとんどの生化学反応に干渉せず,金属イオンと安定した複合体を形成しません.細胞培養,酵素活性研究,タンパク質発現に広く使用されています. 293T細胞では,HEPESの追加は代謝活動によって引き起こされるpH変動を減らすのに役立ちます.細胞が適切な成長環境にあることを確保する.
293T 細胞のための理想の pH 環境
HEPES自体には広いバッファ能力があるが,293T細胞のための培養基内のpH設定には,細胞の生理学的好みを考慮する必要がある.研究によると,293細胞系 (293Tを含む) は,軽く酸性な環境を好む.しかし,実用的な操作では,HEPESのバッファ効果と細胞培養基質の普遍性を考慮すると,一般的に,培養基質のpH値を 7 と 7 までの値に調整することが推奨されます..0と72これは,細胞が軽く酸性のある環境を好むことを満足させるだけでなく,HEPESバッファシステムの有効性を保証します.塩分性による細胞成長抑制や形態学的異常を回避する.
調整戦略の実践
1添加されたHEPESの量: 実験要求によると,適切な量のHEPESを追加することで,細胞培養中に細胞代謝によって生成される酸性物質を効果的に緩衝し,pH安定性を維持することができます..
2pH 調整に NaHCO3 を使用する: HEPES は主要バッファリング成分であるが,PH 値を目標範囲に初期調整するために,培養基に NaHCO3 を加えることも必要である.NaHCO3の純度と製造元による違いにより,異なるバッチのpH値がわずかに変化することが注意すべきです.したがって,新しいNaHCO3のバッチを使用するときは,培養基のpHが7〜7の範囲に低下することを確保するために,pHメーターを校正する必要があります.2.
3細胞培養過程では,培養基内のpH値を定期的に監視し,必要に応じて調整する必要があります.HEPESは強いバッファリング能力を備えています細胞培養や高密度細胞培養は,PHが徐々に変化する可能性があります.新鮮な培養基を適時に置き換えるか,適切なHEPESバッファを追加することが,良好な培養状態を維持するための鍵です..
4パーソナライズされた調整: 異なる実験室における実験条件 (二酸化炭素濃度,温度など)細胞のPHに対する敏感性に影響する可能性があります.基本的ガイドラインを順守しながら,実際の状況に応じて個別調整することが不可欠です.
HEPES の適切な pH 範囲を理解し,制御することは,293T 細胞を育てるための基本的で重要なステップです.定期的なモニタリングと調整実験の信頼性を向上させ,再現性を低下させる.細胞培養は科学であり芸術でもありますHEPES の優位な製造者として,生物学的バッファ剤Deshengは,生産者が準備し,使用するために, 99%の純度で原材料を供給することができます. それは便利で,シンプルで, 安定したバッファリング性能を持っています.詳細については,自由に問い合わせてください.!
