生物バッファは,少量の酸/塩基を加えると溶液のpH値を比較的安定させることができる溶液の一種である.生物的なバッファpKa値は,分子の50%が酸性構造と50%が基本構造を持つときのpH値として定義されます.生物学的なバッファに関する一般的な原則は,pK値の周りに1pH単位以内にpH値がなければならないということです.この方法により,酸構造と基礎構造に同時に存在している分子が,H+またはOH-を加えるとそれらを中和させるのに十分であることを保証することができます.この方法により,バッファは,pHの変化によって引き起こされるタンパク質の安定性の変化を防ぐことができます.
多くの物質は生物バッファに使用できる.よく使用されるバッファ成分は,通常中性に近いpKa値を有し,生理学的pH範囲の周りに使用することができる.以下は,最もよく使用される3つの生物バッファリストです.タンパク質浄化プロセスに影響を与える可能性のある利点とデメリットこれらのバッファの濃度は通常 25mM です..
1MOPS バッファ溶液: PH 範囲は6.5〜7.9温度によって PH値が一定程度変化し,生理学的 PH値範囲内で高いバッファング能力を有します.
2PH範囲は6.8〜8.2温度によって PH値が一定程度変化し,特定の条件下で自由基が生成されます.
3TRISバッファ pH 7.5-9.0温度や稀释度によって PH値が一定程度変化し,酵素活動に影響を与えます.紫外線吸収はなく,安価です.
バッファー溶液の機能は,溶液のpH値を限られた範囲内で調節し,試験溶液の酸性は分析方法によって指定された範囲を満たすことです.例えば,フェノールは,アルカリ性介質とカリウムフェリシアニードの存在下で4アミノアシドと結合することができる.ティピリンは,オレンジ色の赤色抗ピリン染料を生成するために反応する.芳香アミンの干渉を防ぐために最適な pH は 10±0 です.2このため,試験溶液にアンモニア-マネークロロイドバッファ溶液を加え,試験溶液のpHを10.0±0に調整し,制御する必要があります.2.
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