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ウイルスの輸送媒体の不活性化の効果の証明の実験

2020-06-16
ウイルスの輸送媒体の不活性化の効果の証明の実験

2つのタイプのウイルスの見本抽出管で加えられるウイルスの輸送媒体があります1つは変更された溶解ウイルス蛋白質の抽出の核酸の不活性にされた保存の解決であり、他はウイルスの生体外の活動、核酸の維持であり、変更される抗原は中型輸送に基づいて非不活性にされた保存の解決を完了します。不活性にされた保存の解決のために、ウイルスを効率的に不活性にし、二次伝染を防ぐことは重要です。

 

非不活性にされたタイプと別、不活性にされたウイルスの輸送媒体はウイルスを効率的に不活性にし、二次伝染から効果的にオペレータを防ぐことができる換散の塩の高い濃度と加えられます。しかしそれはまたNT-PCRによって続いて検出することができるように低下からウイルスの核酸を保護できるRnaseの抑制剤を含んでいます。不活性化の効果は実験的に次確認されます。

1. 不活性化の証明材料

1つのSPFの鶏の胚(および古い10日に単独で工夫されて)

2鶏の伝染性の気管支炎のウイルスIBV QXL87の緊張

3正常な塩(0.9% NaCl)、オートクレーブに入れられる

4つの不活性にされたサンプル貯蔵の解決、3つのバッチ。

5つのRNAの抽出のキット

 

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ウイルスの輸送媒体はウイルスを不活性にします

 

2. 実験方法

1. 1の比率に従って保存の解決に準備された鶏の伝染性の気管支炎のウイルスQXL87の緊張を、加えて下さい(ウイルスの解決):10は45minのための18-26℃で(保存の解決)、室温を置き。ウイルスの液体はSPFの鶏の胚に再接種され、allantoic液体は収穫されました。

 

2. allantoicキャビティ接種方法に従って10つの幾日古いSPFの鶏の胚に1で収穫されるallantoic液体を再接種して下さい。各サンプルは10つの鶏の胚、0.1 mL/pieceと再接種され、144 hのための37°C定温器に置かれ、そして放棄されます。死んだ鶏の胚の24のhの後で、接種の後に病気にかかった生きている胚の鶏の胚の死そして数の24-44 hを観察し、記録して下さい。鶏の胚の損害の観察、およびRNAを得るためにGB/T 23197-2008の鶏の伝染性の気管支炎の診断技術を、RNAの抽出のキットを使用して参照しウイルスの検出のためにワン・ステップ方法実時間RTqPCRを使用する鶏の収穫されたallantoic流動の伝染性の気管支炎のウイルスの核酸の検出。

1/2/3匹の加えられたウイルス(100ul)を+保存の解決(900ul)分けて下さい;グループ4はウイルス(100ul)を+生理学塩加えました(900ul);グループ5/6/7の加えられた保存の解決(1000ul)。その中で、ウイルスの輸送媒体は3つのバッチにあります。

 

3. 実験結果

上記の実験結果に従って、グループ1、2および3は鶏の胚は普通育ったことを示したウイルス含んでいる防腐剤と再接種されました、;グループ4はウイルス加えられた生理学塩のおよび鶏の胚の損害と再接種されました;グループ5、6、および7は鶏の胚の成長の阻止を示さない防腐剤と再接種されました。これは不活性にされた保存の解決がウイルスを不活性にすることができることを示します。

 

この実験によって、私達は最終的にDeshengのランダム サンプリングの3つのバッチが保存の解決を効果的にウイルスを不活性にすることができる不活性にし細胞の正常な生理学機能に対する抑制的な効果をもたらさないことを示してもいいです。従って、この不活性にされたウイルスの輸送媒体RTqPCR核酸の検出の実験のために適しているそれは効率的にさまざまなウイルスを不活性にし、核酸を得ることができます。当然、より速いテストの点から見て、結局、新しい王冠のウイルスが得あまり易くないので、患者の検出のために直接使用される新しい王冠によって、中国の少数の会社そうします診断しました!