HEPES (4-(2-Hydroxyethyl)-1-piperazineethanesulfonic acid) は,CAS 7365-45-9号のツウィテリオンのバッファである.このバッファは,通常,生化学実験で,反応システムのPHを調整するために使用されます.ウイルス保存溶液や細胞保存溶液など. 細胞に毒性がないし, PH を長期間維持する. 細胞培養介質や化粧品に常に適用されます.
HEPESバッファpH 7.2-7 の範囲で良いバッファ能力を持つ非イオン性アンフォテリックバッファです.4この基準では,細胞観察や培養環境において,比較的安定したPH値を維持することが主な特徴です.細胞培養コビの蓋は,必要な炭酸が空気に漏れないようにしっかりと締め付けなければならない..
HEPESバッファの準備方法
必要な濃度で準備された培養基にヘプスバッファを直接加え,その後フィルター消毒を行う.培養液の1000mlに2.38グラムのヘプス粉末を加える.PH を 7 に調整する.2 1NNaOHで溶解し,フィルタリングし,施す前に無菌化すると,この時点でHEPES濃度は10mmol/Lである.
1mlの原溶液に99mlの細胞培養介質溶剤を加えると,HEPESの濃度はまた10mol/Lになります.下記は1mol/Lの原溶液を準備する方法です.まず,溶解 23.8gのHEPESを90mlの二重蒸留水に2次,ナオヒ1NでpHを7.5〜8.0に調節し,3次,水調節剤で100mlまで作る 2mlボトルに梱包する前にフィルタリングと消毒し,最後に4°Cまたは-20°Cで保管する.
高温耐性があり,溶融点が200°Cに達すると,HEPES粉末は,オートクラブで分解されません.HEPES 水溶液が3時間,周囲の光にさらされている場合毒性のある水素過酸化物 (H2O2) が生成されます.したがって,2つの点に注意を払う必要があります.一つは,HEPES水溶液は実験結果に影響しないように光から遠ざかなければなりません.溶媒として構成された後,4°Cで保管し,より良い結果を得るため,短時間で使用する必要があります.もう"つ は,通常 乾燥 し た 部屋 に 置い て 長く 太陽 の 光 に 直接 晒す こと は でき ない.
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