HEPESの緩衝の適用
HEPESは（4 （2 Hydroxyethyl） - 1-piperazineethanesulfonic酸）生化学的な実験でzwitterionic緩衝、CAS第7365-45-9、この緩衝一般に使用されているウイルスの保存の解決または細胞の保存の解決のような反作用システムのPHを、調節するのにである。それに細胞の有毒物質がないし、PHを長い間維持する、細胞培養の媒体および化粧品で応用常にである。
HEPESは7.2-7.4のpHの範囲のよいバッファ キャパシティの非イオンの両性緩衝である。その主要な機能は培養基または細胞の観察の比較的安定した水素イオン濃度指数を維持することである。これらの標準の下で空気に脱出する必須の炭酸塩を避けるために、細胞培養のフラスコの帽子は堅くきつく締められるべきである。
HEPESの緩衝を準備する方法。
Hepesの緩衝はフィルター殺菌に先行している必須の集中の準備された培養基に直接加えることができる。HEPESの粉の2.38グラムを文化解決のあらゆる1000mlに加え、1NNaOHとの7.2に分解の後でPHを合わせ、現時点で、HEPESの集中を適用する前にである10mmol/L.ろ過し、そして殺菌しなさい。
99ml細胞培養の中型の溶媒を1ml貯蔵液に加えて、HEPESの集中はまた10mol/L.Belowである1mol/L.のHEPESの貯蔵液を準備する方法である。最初に、90mlへの分解23.8g HEPESは水を二重蒸溜した;2番目に、pHを1N NaOHとの7.5-8.0に合わせる;3番目に、水titrantとの100mlまで作る;、2mlびんに詰められるの前にろ過し、殺菌する;ついに4℃か-20℃で貯えられて。
200°Cまでの高温抵抗力があるそして融点によって、HEPESの粉はオートクレーブによって低下しない。関連した文献に従って、HEPESの水溶液が3時間包囲されたライト--にさらされれば、有毒な過酸化水素（H2O2）は発生する。従って、2ポイントは1つである水溶液がために実験結果に影響を与えないためにライトから離れた保たれなければならないHEPES注意をに払われる必要がある。溶媒として形成の後で、それは4 °Cで貯えられ、よりよい結果のための短いある一定の時間に使用されるべきである。別のものは乾燥した部屋に一般に置かれ、日光に直接長い間露出することができない。
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