トリス:トリメチロールアミノメタン
トリスメチラミノメタン (Tris) は,公式 (HOCH 2) 3CNH 2 の有機化合物である.トリスベース生物化学および分子生物学実験におけるバッファを準備するために使用されます.生物化学実験で使用されるTAEおよびTBEバッファの両方 (ヌクレオ酸を溶かすために使用されます) はTrisを必要とします.アミノグループを含むときアルデヒドと凝縮する緩衝特性 トリスは弱基である.室温 (25°C) でpKaは8である.1バッファリング理論によると,トリスのバッファーの有効なバッファリング範囲は pH 7.0 と 9 の間です.2.
トリス塩基の水溶液のpHは約10です5通常,塩化水素が pH 値を望ましい値に調整するために加えられ,この pH 値を持つバッファ溶液が得られます.トリスのpKaに対する温度の影響は制御されるべきである..
トリスバッファは弱いアルカリ溶液であるため,DNAはそのような溶液でデプロトン化され,溶解性が向上します."TEバッファ"を作るため,しばしばTris塩化酸バッファに EDTAを追加します..TEバッファはDNAの安定と貯蔵に使用される. pH調整された酸溶液を乙酸に置き換えると"TAEバッファ" (Tris/Acetate/EDTA) が得られる.そして,ボリック酸で置き換えた場合核酸電解実験で使用される.この2つのバッファは,核酸電解実験で用いられる.
1 M トリス-HCl (pH7)47 について68.0) について
成分濃度 1M Tris-HCl
調製量 1L
調理方法:
11リットルのカップに121.1gのトリスを
2約800mlの離子化水を加え,溶けるまで混ぜます.
3必要な pH 値を調整するために,下記の表に示されているように濃縮された HCl の量を加えます.
pH 濃縮されたHCl
7.4 約70ml
7.6 約60ml
8.0 約42ml
4溶液を1Lに
5高温および高圧消毒後,室温で保管します.
注: 溶液のpH値が温度によって大きく変化するため,pH値を調整する前に室温まで冷却させる.温度が1°C上昇すると溶液のpH値は約0.03単位減少します.
1.5 M トリス-HCl (pH8.8)
成分濃度 1.5M Tris-HCl
調製量 1L
調製方法
11リットルのカップに181.7gのトリスを
2約800mlの離子化水を加え,溶けるまで混ぜます.
3濃縮水素でpHを8.8に調整する.
4溶液を1Lに
5高温および高圧消毒後,室温で保管します.
注: 溶液のpH値は温度によって大きく変化するため,pH値を調整する前に室温まで冷却する必要があります.
溶液のpHは,温度が1°C上昇するごとに,約0.03単位減少する.
Tris-HCl バッファーの利点は以下の通りである.
1トリス基はよりアルカリ性があるため,このバッファシステムを使って,酸性からアルカリ性までの pH 値の広い範囲のバッファ溶液を調製できます.
2 生物化学プロセスに少なめの干渉,カルシウム,マグネシウムイオン,重金属イオンによる降水はありません.
欠点は次のとおりです
緩衝溶液のpH値は溶液濃度によって大きく影響され,緩衝溶液は10回稀釋され,pH値は0以上変化します.1;
温度効果は大きく,温度変化はバッファ溶液のpH値に大きな影響を及ぼし,△pKa/°C=−0である.031例えば,バッファ溶液のpHは4°C=8です.437°CのpH値は7である.4室温で調製されたTris-HClバッファは,使用温度で調製しなければならないので,室温で調製されたTris-HClバッファは,0°C~4°Cでは使用できません.
3 空気中のCO2は簡単に吸収されるので,準備されたバッファはしっかりと密封する必要があります.
4 このバッファ溶液は,特定のpH電極を干渉するので,Tris溶液と互換性のある電極を使用します.
トリス溶液は空気から二酸化炭素を吸収します 貯蔵中に密封に注意してください
TEはTris-EDTAバッファ (10mMTris,1mMEDTA,pH7.4pH7.6pH8.0) である.
DNA分解のための分子生物学の常用反応剤
10×TEバッファ (pH7) を準備する.47 について68.0) について
成分濃度: 100mM Tris-HCl,10mM EDTA
調理容量: 1L
調理方法:
1次の溶液を測定し,1Lのカップに入れます.
1M トリス-HClバッファ (pH7)47 について6, 8.0) 100 ml
500 mM EDTA (pH8.0) 20ml
2約800mlの離子化水をビースに加え,均等に混ぜます.
31L に調整した後,高温と高圧で無菌化します.
4室温で保存する.
