最近、私はよい緩衝についての顧客の照会を常に受け取りますが、何回も顧客自身は彼らの厳密なプロダクトを丁度表現できません。今でも実際に理解する少数の人々があるので、私は簡潔によい緩衝の管とHEPESのよい緩衝そして違いをもたらします。
よい緩衝、別名zwitterionic緩衝は、生命科学の研究に専用されているタイプの緩衝システムです。彼らは加わらないし生化学的な反作用プロセスと、そしてもたらしません酵素の化学反応に対する抑制的な効果を干渉しないし。従って、彼らは細胞器官および電極のためにとりわけ使用されます。揮発、pHに敏感な蛋白質および酵素の研究活動。これらの緩衝システムは次の特徴があるべきです:
1. pKaの価値は6-8の間にあります;
2. 水の高い容解性;
3. biofilmを突き通すこと容易;
4. 少し塩効果;
5. イオン集中、解決の構成および温度は分離に対する僅かな影響をもたらします;
6. 金属イオンが付いている複雑または沈殿物;
7. 緩衝は化学的に安定しています;
8. 紫外および目に見える波長範囲のライトの小さい吸収;
9. 容易に農産物の高純度の塩。
よい緩衝の管そしてHEPESは私達の一般的な緩衝であり、紛糾してつながります。ある程度は、それらに知人の機能がありますが、また自身の機能および利点があります。私達がよい緩衝を理解した後、私達が使用する彼らのそれぞれの特徴をよりよい選択でもいいように、私達を許可して下さい私達をゆっくり突き通ります彼らのそれぞれ分野に管およびHEPESを見てみることを許可して下さい:
pHのバッファ範囲は水様NaOHの解決の水およびsolubleの6.1-7.5、不溶解性です。管はbisの（2 hydroxyethyl）アミノ グループを含んでいる緩衝と異なって（Bistris、Bicineのような）、ほとんどの金属イオンが付いている安定した複合体を形作ることができません。それは金属イオンを含んでいる解決システムの緩衝のために適しています。既存の研究結果に従ってエシェリヒア属大腸菌からのtransketolaseを結晶させるために、管はゲル濾過によって、そして緩衝としてphosphocelluloseクロマトグラフィーを使用してtubulinの浄化、組換えのGTP結合蛋白質ARF1の浄化およびARF2に加えることができます。さらに、管が遊離基を形作ることができるのでそれはレドックス システムの使用のために適していません。陽イオン交換クロマトグラフィーでは、管の緩衝の低い集中は管に比較的大きいイオン強さがあり、pKaの価値が集中依存しているので使用されるべきです。A
pHのバッファ範囲は6.8-8.2です。それは水で溶けます。より長い一定期間のための一定したpHの範囲を制御できるのは水素イオン緩衝です。最終的な集中は10-50mmol/Lであり、一般的な培養基はバッファ キャパシティを達成するために20mmol/L HEPESを含んでいます。それは金属イオンが付いている安定した複合体を形作らないし、ほとんどの場合、生化学的なプロセスと干渉しません。HEPESはさまざまなタイプの有機体の細胞培養媒体で一般的です;蛋白質の研究では、管は陽イオン交換クロマトグラフィーの緩衝部品および溶離液の組合せとして頻繁に使用されます;分離のための反作用の緩衝、前交配の緩衝、交配の緩衝およびRNAの核部品の分析;3 ′ - RNAおよびT4RNAのリガーゼのために分類するターミナル;キット、DNA/RNAの抽出のキットおよびPCRの診断のの生化学的な診断試薬で使用されるキット。DNAの研究では、管はカルシウム隣酸塩のための緩衝およびDNAが電気穿孔法の実験のための形成システム、AFMおよび緩衝を沈殿させると同時に使用されます。さらに、HEPESはDNAと制限の酵素間の反作用とLowryの方法が蛋白質内容を定めることができるように干渉し、適していません。
それは金属イオンを含んでいる解決システムのために適している管もHEPESも金属イオンが付いている安定した複合体を形作ることができないこと見ることができます。但し、またその間にある特定の相違があります。容解性の点では、管はHEPESによい水容解性があるが、水で不溶解性です;バッファ範囲の点では、管はニュートラルに酸性であり、HEPESはアルカリに中立です。これらは同じであり、それらをよりよく選ぶために、私達が最初にそれらを理解しなければならないことを別すべては私達に告げます。Deshengによい緩衝で既に広範な経験があります。それは技術プロダクトを、教えます必要とするものを区別するために右の選択を選ぶ方法を与えます。そのような会社をなぜ選ばないか!
