薬剤の使用において新しいトリンダーの試料 TODB,高背景は検出結果に影響を与える一般的な問題であり,密封不十分と皿洗い不完全は,動作中に容易に見過ごされる重要な要因です.この2つの問題は,非特異的な結合と残留物質からの干渉により,色背景の異常な増加を引き起こす可能性があります.詳細な分析と解決策は以下です.
閉ざしの不十分:非特異的な組み合わせの背後にある"幕後"の推進力
阻害ステップの機能は,反応媒体の表面 (酵素結合免疫吸収剤測定板など) の結合しない部位を阻害することです. 密封が十分でない場合,基板, 酵素結合物,および TODB 試料の他の成分は,標的物質の参加なしに色信号を形成して,無作為にキャリアの表面に吸収されます.背景値を直接増加させる.
特定の理由
1密封時間不足: 一般的に密封するには,37°Cで60分,室温で120分放置する必要があります.時間が30分未満に短縮された場合,キャリア表面の活性部位は,遮断溶液 (BSAなど) によって完全に覆われない.阻害されない水害性領域は,TODB反応システム内のタンパク質成分を積極的に吸収し,背景色が形成されます.
2阻害溶液の濃度が低すぎる: 阻害溶液の有効成分が不十分である場合,例えば,元の5%BSAが1%に低下した場合,密度の高い保護膜が分子の間に形成されないTODB試料のホースレディッシュペロキシダースのような成分は,水害性の相互作用によってプレートポースの内壁に粘着します.反応中に基板に非特異反応が起こります.
3密封溶液の不具合:密封溶液が繰り返し冷凍され,溶かされ,または有効期限を超えて保管され,内部にあるタンパク質成分が劣化し 密封機能を失います背面信号の源となる. 背面信号の発生源は,
不完全な板洗浄:残留物質の"堆積効果"
プレート洗浄の主な機能は,結合していない自由反応剤 (結合していない抗体,TODB前駆物質など) を除去することです.プレート洗浄が徹底されていない場合,残留物質は,次の反応で色の発達に引き続き参加します.背景の干渉が蓄積することを可能にします
具体的理由
1. プレート洗浄が少ない:従来の検査ではプレートを3〜5回洗う必要があります. 2回未満に減少した場合,井戸内の残留フリー酵素複合体は完全に除去できません.そして反応はTODB基板と反応します色の発達が進んでいる.
2洗剤残留物が多すぎる:ボードを洗った後,吸収紙の穴を逆向きに押さえて乾燥させなければ,各穴に洗剤残留物が多く残ります.そして内部の一部は,TODB反応システムのバランスを乱します液体と隣接する穴に浸透し,クロス汚染を引き起こし,背景を上昇させる.
3洗濯機の針が詰まったり,圧力が不十分だったりすると,プレートの穴の角は洗えない領域になります残りのTODB反応体は乾燥後結晶化し,再び溶解すると反応に参加し,地元の背景色が暗くなる.
概要: 背景制御の有効性を決定する操作の詳細
密封と洗浄プレートは日常的な手順ですが,その質は直接TODB反応体の背景レベルに影響します."密封時間の延長+皿洗いの数の増加"の方法を採用することが推奨されます密封溶液の濃度をチェックし,洗濯機を定期的に校正するなどの措置と組み合わせた背景値を著しく減少させ,検出結果の正確さを保証する.
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