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連続した緩衝TAEおよびTBEの比較

2020-09-18
連続した緩衝TAEおよびTBEの比較

私達はDNAの電気泳動を行うとき緩衝液を常に加える。一般的な緩衝液はTris、アセテートおよびエチレンジアミン四酢酸を含んでいる、およびTBE (Trisホウ酸塩エチレンジアミン四酢酸)を含んでいるTAE。

 

緩衝の役割は何であるか。緩衝の機能の1つは解決の馬小屋のpHを維持することである。酸素および水素イオンを発生させるために水を通した電流のパスが陽極に、酸化反作用起こる時;減少の反作用は陰極に水素および水酸化物イオンを発生させるために起こる。長期電気泳動はアルカリに陽極酸および陰極をする。よい緩衝システムは基本的に安定した両方の棒で解決のpHを保つ強いバッファ キャパシティがあるべきである。電気泳動の緩衝のもう一つの機能は持っているDNAの分子の移動を促進するある特定の伝導性を解決をすることである。DNAは電気泳動の間に負荷電のアルカリ物質である(緩衝pH=8)は否定的な電極から肯定的な電極に移住し。

 

電気泳動の緩衝のもう一つの部品は目的がMg2+血しょうのキレート環を作り、電気泳動の間にDNaseの活発化を防ぐことエチレンジアミン四酢酸である。核酸の低下を避けるためにヌクレアーゼの必要性がこれらのイオン、エチレンジアミン四酢酸これらのイオンをしっかりと握ることができるので。しかしマグネシウム イオンがまた多くの酵素の補足因子、制限の酵素、DNAポリメラーゼ、等のようなである、従ってエチレンジアミン四酢酸の集中は一般に余りに高くないことが注意されるべきである(通常およそ1mM)。

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Desheng TRISの緩衝包装

従ってよりよく、TAEまたはTBEはどれであるか。実際、私はどれをDNAの電気泳動のために使用するべきであるか。それはあなたの実験の目的によって実際に決まる。2の間で相違を見てみよう。

1. TBEの伝導性はTAEのそれより大きい。従って、TAEと比較されて、TBEは電気泳動タンクで過熱させをもたらしてまずない。TBEは長期電気泳動のために推薦される。

 

2. ホウ酸は酵素阻害剤である、従って消化力の反作用のための電気泳動DNAを分ける必要があれば電気泳動の緩衝液としてTAEを使用することを推薦する

 

3. TBEはより小さい片を分けるためによりよい。300bpより小さい片のためにTBEの移動の速度は2%のアガロースのゲルでより速い。

 

4. TAEは大きい片の分離のために適している。2kbより大きい片TAEにより速く移住するために(0.8%のアガロースのゲルで)、および速度はTBEで速いより約10%である。TAEはDNAの片の回復のためにより適している。TBEと比較されて、TAEにsupercoiled DNAのための高リゾリューションがある。

 

要約するとTBEかTAEがあるかどうか、質問はのよりよく一般化することができない。最も適した緩衝システムは特定の実験目的に従って選ばれるべきである。Deshengによって開発される生物的緩衝に広いバッファ範囲があり、この種類だけの緩衝使用される。システムは水素イオン濃度指数の広い範囲が付いている緩衝を準備包装のさまざまな指定を提供できる。生化学的な、歓迎されたDeshengの買物の緩衝相談し、購入するため。