導入
帽子、3 (cyclohexylamine) - 1-propanesulfonic酸、有機性化学薬品、白い結晶の粉、CAS1135-40-6は、生化学的な診断キット、DNA/RNAの抽出のキットおよびPCRの診断ので生物的緩衝、一般的なキットです。基本的な薬剤の酵素化学そして高性能液体クロマトグラフィーの分離のための緩衝はプロテウス菌の配列の膜の移動プロセスで広く利用されています。帽子は帽子、脱イオンされた水、等で構成されます緩衝し、pHはpurificationofのfibronectinのために11.0に合わせられます。
帽子の緩衝
操作の急所
1. SDS-PAGEの電気泳動:慣習的な条件(帽子システムに従って:のため> = 20kD蛋白質;Tris Tricineシステム:高分子量蛋白質の低分子量蛋白質のため、また);
2. メタノールの集中:緩衝をelectroimprinting帽子のメタノールの集中の範囲は0-20%です(メタノールの集中は高いです、低分子量蛋白質の移動のために使用されて;メタノールの集中は低かったりまた更に高分子量蛋白質の移動に使用するメタノールを含んでいません);
3.PVDF膜の処置:PVDFの膜を取り、数秒のメタノールで浸し、そして次に緩衝をelectroblotting帽子に入れて下さい。(ノート:PVDFの膜は操作の後で乾燥から防がれます。膜が乾燥していたら、このステップの操作を繰り返して下さい);
4. ゲルの処置:ゲルのゲルを取除き、5-10分の帽子の緩衝で浸して下さい。(ノート:このステップはある強い基本的な蛋白質を移すときPI > 9.0)省略することができます;
5. 移動スロットを取付けて下さい:ろ紙およびスポンジを電子しみが付く緩衝で浸し、そしてスポンジ、ろ紙、PVDFのフィルム、ゲル、ろ紙およびスポンジの順序で電気捺印サンドイッチを押し、小さい電気回転式スロットに入れて下さい。
6. 移動の状態:0.5-2hのための室温の50V一定した圧力の移動(100-170 MA)。(ノート:ゲルとPVDFのフィルムの間で泡を流出させて下さい。例えば、70 KDの上の蛋白質は長い時間の間移るべきです);
7. PVDFの膜の染まることの前処理:PVDFの膜を取り、脱イオンされた水との洗って下さい、数秒のメタノールで浸し、そして染めて下さい;
8. 膜の染まること:30-50秒(1分以下)の間(40% methanol/1%の酢酸でCoomassieの0.1%の華麗な青R-250を分解しま)染まるCoomassieの華麗な青脱イオンされた水と十分に洗浄し、次に乾燥する50%のメタノール(変更の漂白の解決頻繁に)と漂白します;
CAPSbufferの 準備
1. 次の通り10×CAPS (100mmol/L)緩衝液は準備されます:帽子、22.13g;900mlに脱イオンされた水を加えて下さい;水素イオン濃度指数を2mol/L NaOHとの11.0に(20mlについて)合わせ、そして1Lに薄くし、そして4℃で貯えて下さい。
2. 緩衝(10%のメタノールを含んでいる1×CAPS)をelectroimprinting帽子は次の方法によって準備されます:10の×の帽子の200ml;メタノールの200ml;脱イオンされた水の1600ml。
他の適用
また帽子が製造のための溶接材料、空気調節装置および原料を製造するのに使用されています;また火工術を製造することを使用します;それは分析的な試薬、熱交換のキャリアとして使用され、製薬産業でも使用されます;それは空気調節、火工術、乾電池のために使用されます;それはまた変化およびdesiccantとして使用されます;それはペンキ企業で水様のイソシアン酸塩の治癒代理店のために使用されます。Deshengの会社はそれ以上の相談にをさまざまな生物的緩衝のR & Dそして生産、帽子、Tris、Bicine、モップ、高い純度の≥ 99%、安定したプロセス、歓迎された企業および個人との等を含んで、専門にします。