細胞培養におけるHEPES 7365-45-9バッファの濃度選択

4-ヒドロキシエチルピペラジンエタヌスルフォン酸 (HEPESバッファ) は,広範囲のpH範囲 (6.8〜8.2) で安定したバッファ効果を提供する能力により,重要な水素イオンバッファとして細胞培養分野で広く使用されています.この記事では,細胞培養におけるHEPESの濃度選択を詳細に検討します.研究者への実践的な指導を目的としています.
 

 
細胞培養におけるHEPESの適用
 
細胞培養におけるHEPESの主な機能は,培養基内のpH安定性を維持することです.空気からの二酸化炭素が培養瓶に入ると,培養介質のpH値が上昇する可能性があります.HEPES を加えることで,この現象を効果的に防止し,適切な範囲内で pH を維持できます.

 

 
HEPES 粉
 
HEPES の適切な濃度を決定する
 
1細胞系の違い
 
異なる細胞系間では,HEPES濃度の需要が異なります.濃度グラディエント実験によって最適な濃度を決定することが必要である場合がある.成長状態,増殖率,および生殖速度を観察するために,従来の範囲である10~25mMから2mMの濃度グラディエントを設定することが可能です.異なる濃度で細胞の代謝活動細胞線に最も適したHEPES濃度を見つけるために
 
2文化媒体の組成の影響
 
HEPES は培養基内の他のバッファシステム,例えばバイカーボネート・バッファシステムと相互作用する.培養基内のバイカーボネートの濃度が変化すると,添加されたHEPESの最適量は,それに応じて変化する可能性があります.研究によると,バイカーボネートの濃度を30mMに増加させ,バイカーボネートの濃度を減少させることで,細胞成長のためのpH安定性をより良く維持し,細胞増殖を促進することが示されています.
 
3. 温度の影響
 
細胞の代謝速度に影響する重要な要因は 温度です 細胞のpH需要に影響します 標準栽培温度37°CではHEPES は 効果 的 な 緩衝 効果 を 発揮 するしかし,特定の昆虫細胞のような特定の特殊細胞では,最適な培養温度が低くなる可能性があります.この時点で,HEPESの濃度を再評価する必要があります.温度の変化により 細胞内の酵素活動と代謝経路が変化します酸やアルカリの生成率の変化につながる可能性があります.
 
HEPESのバッファ効果を改善するための方法
 
1. 流体変化の頻度を最適化
 
HEPES の 緩衝 容量 が 完全に 利用 さ れる 前 に 希釈 さ れる こと が あり ます.したがって,異なる細胞ラインの代謝率を研究し,適切な流体交換頻度を決定することが重要です代謝が遅い細胞では,HEPESが培養基間に持続的かつ安定したバッファ効果を確保するために,液体の変化間の間隔を適切に延長することができる.細胞成長環境に対する液体の変化の影響を軽減する.
 
2. HEPES の損失を減らす
 
培養基質の保存と使用中に,光と高温などの要因は,HEPESの分解につながる可能性があります.したがって,光がHEPESに影響しないように,培養基を茶色のガラスボトルに保管することが推奨されます.同時に,培養基質を構成する際には,長期保存によるHEPESの損失を減らすために,現場での使用と調製の原則を遵守する必要があります.細胞培養過程中,有効な濃度を維持することを確保する.緩衝効果を高めます
 
 

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